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y Fisiologa y morfologa del sistema leucocitario:recuento y clasificacin de los leucocitos, tcnicas histoqumicas e inmunolgicas de identificacin leucocitaria Patologas del sistema leucocitario: alteraciones cuantitativas y cualitativas, pruebas analticas para el diagnstico y seguimiento de estas patologas yBIBLIOGRAFAMercedes Rodrguez Buenavida. Tcnicos Especialistas de Laboratorio en anlisis clnico. Editorial Kronos S.A. 1998 Jean Bernard, Jean Paul Lvy, Bruno Varet. Manual de hematologa. Editorial Toray-Masson. 1982 William J.Williams. Manual de Williams de hematologa. Editorial McGraw-Hill Interamericana. 1997 J.M. Moraleda Jimnez. Hematologa, Patologa mdica .Editorial Medicina 2000. 1996 J. Sans-Sabrafen. Hematologa clnica. Editorial Mosby/Doyma Libros. 1994

OBJETIVOSEstudiar la clasificacin de los leucocitos Aprender a contar los leucocitos Profundizar en las distintas patologas del sistema leucocitario

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1.

FISIOLOGA Y MORFOLOGA DEL SISTEMA LEUCOCITARIO: RECUENTO Y CLASIFICACIN DE LOS LEUCOCITOS,TCNICAS HISTOQUMICAS E INMUNOLGICAS DE IDENTIFICACIN LEUCOCITARIA

Los leucocitos son las clulas nucleadas de la sangre circulante. Participan en la defensa del organismo frente a las infecciones.

1.1 Clasificacin de los leucocitosUna de las principales caractersticas de la morfologa de los leucocitos es que conservan su ncleo. Atendiendo a la morfologa del ncleo podemos dividir los leucocitos en: Mononucleares: linfocitos y monocitos, presentan un ncleo sin lobulaciones ni estrechamientos. En su citoplasma no aparecen granulaciones, o si lo hacen es en un nmero muy bajo. Polinucleares: tambin denominados granulocitos, aqu incluimos los neutrfilos, basfilos y eosinfilos. Estas clulas poseen un solo ncleo pero a su vez ste presenta diversas segmentaciones, por lo que parece que tienen varios ncleos. Presentan multitud de granulaciones en su citoplasma y su nombre hace referencia al tinte con el cual podemos teir estos grnulos: los basfilos se tien con colorantes bsicos, adoptando tonos azules. Los eosinfilos se tien con colorantes cidos, tomando tonos rojos, y los neutrfilos se tien con ambos tipos de tintes.

A. NeutrfilosSon clulas redondeadas con un dimetro de 12-14 m. Presenta un ncleo condensado y dividido en varios lbulos, normalmente tres (aunque oscila entre 2 y 5), unidos entre s por cordones de cromatina; sta ltima hace que se tia intensamente. Este ncleo segmentado le permite mayor facilidad a la hora de atravesar espacios pequeos, las clulas que presentan ncleos sin segmentar tendrn mayor dificultad. En el citoplasma de los neutrfilos nos encontramos con multitud de granulaciones con un tamao de 0'2 a 0'3 m y que se tien de color rosado, marrn o azul negruzco; sus principales componentes son lactoferrina, lisozima y fosfatasa cida. Estas clulas tambin presentan granulaciones azurfilas, pero son difciles de ver. Estas granulaciones azurfilas se denominan primarias y estn presentes en todos los granulocitos, siendo inespecficas, las granulaciones propias de cada tipo (eosinfilas, neutrfilas o basfilas) se denominan secundarias. Son los leucocitos ms frecuentes en sangre perifrica. La principal funcin de los neutrfilos es ayudar al sistema inmunitario mediante la fagocitosis.

B. Neutrfilos en bandaEn la ltima fase de la maduracin de los granulocitos es cuando se produce la segmentacin nuclear; a continuacin explicamos la secuencia: Metamielocito: presenta un ncleo redondeado, en l se inicia la segmentacin, transformndose en un ncleo arrionado o reniforme.

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Fisiologa y morfologa del sistema leucocitario y Bandas o cayados: en ellos contina la segmentacin nuclear, el ncleo arrionado se alarga, apareciendo un ncleo en herradura. Segmentados: se completa la segmentacin nuclear, el ncleo en herradura se segmenta, apareciendo varios lbulos unidos por cromatina.

Los cayados presentarn ya en su citoplasma grnulos secundarios que indicarn si finalmente obtendremos un segmentado neutrfilo, eosinfilo o basfilo. Cuando en la sangre aparecen ms neutrfilos de banda y menos segmentados hablamos de desviacin a la izquierda, y esto es un signo patolgico.

C. Granulocitos eosinfilosEn su estadio maduro son clulas redondas o ligeramente ovaladas con un dimetro entre 12 y 17 m. Su ncleo posee dos lbulos, generalmente en forma de gafas, (en ocasiones excepcionales tres) y en su citoplasma podemos distinguir, aproximadamente, 20 grnulos con un tamao entre 0,5 y 1,5 m. Estos son brillantes y anaranjados cuando los teimos con eosina. Los principales componentes de estos grnulos son la fosfatasa cida, mieloperoxidasa y arilsulfatasa. Si observamos estos grnulos con un microscopio electrnico podemos ver que presentan el aspecto de una estructura cristaloide slida. Los granulocitos eosinfilos, intervienen en las reacciones anafilcticas y en el control de infecciones parasitarias.

D. Granulocitos basfilosSon clulas redondeadas, un poco ms pequeas que los anteriores, su dimetro va de 10 a 13 m. Son los granulocitos ms pequeos. Su ncleo es bilobulado o presenta slo una pequea "mella"; este ncleo es difcil de ver porque la gran cantidad de granulaciones existentes se acomodan por encima de este y lo ocultan. Estos grnulos tienen un tamao entre 0,2 y 1 m y adquieren un color prpura intenso o rojo violeta cuando los teimos con tintes bsicos. Estn formados principalmente por mucopolisacridos cidos, histamina y glucgeno. Son los leucocitos menos frecuentes. La funcin principal de los granulocitos basfilos es intervenir en las reacciones de hipersensibilidad.

E. LinfocitosSu citoplasma adopta tonalidades azules plidas, por su carcter basoflico. Estas clulas son las principales responsables de la respuesta inmune. Podemos clasificarlos segn su morfologa en pequeos, grandes y clulas plasmticas.

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y Tema 19a. Linfocitos pequeosSon clulas redondas u ovaladas con un dimetro de 6 a 9 m y representan el 85 a 90 % de la totalidad de los linfocitos. Es el leucocito ms pequeo. El ncleo ocupa casi todo el citoplasma y est rodeado por un anillo basfilo que se teir de tonalidades azules. No presentan grnulos secundarios, aunque ocasionalmente podemos encontrar alguna granulacin basfila y siempre un aparato de Golgi en el poco espacio libre del citoplasma.

b. Linfocitos grandesSon clulas redondeadas con un dimetro de 10-15 m y representan el 10% de la totalidad de los linfocitos. Su ncleo ocupa una posicin central o ligeramente desplazada, su citoplasma es ligeramente basfilo y mucho mayor que en los linfocitos pequeos. Pueden presentar grnulos redondeados prpuras denominndose entonces linfocitos granulados grandes y es difcil distinguirlos de los monocitos. Los linfocitos atpicos son difciles de distinguir de los monocitos.

c. Clulas plasmticas o plasmocitosSon clulas ovaladas que presentan un tamao entre 12 y 15 m, y su ncleo es redondo y excntrico. La cromatina se agrupa formando siluetas fcilmente identificables, pudiendo adoptar una disposicin radial conocida como rueda de carro por su aspecto.

F.

Monocitos

Son clulas que pueden adoptar formas diferentes: redondeadas, ovaladas o irregulares, por la presencia de pseudpodos. Su tamao oscila entre 15 y 30 m. Son las clulas de mayor tamao entre los leucocitos. Su ncleo puede ser igualmente variado: redondeado, ovalado, con hendiduras o forma de herradura, y su localizacin es central. La cromatina se dispone formando hileras, de forma laxa. El citoplasma se tie con tonos azul-grisceo y puede presentar granulaciones azurfilas o pequeas granulaciones que se tien con tonos rojo-prpura.Tambin suelen presentar vacuolas fagocticas. Los monocitos se transformarn en macrfagos o histiocitos al llegar a los tejidos, formando parte del sistema mononuclear fagoctico (SMF).

1.2 Recuento de los leucocitosExisten dos formas de contar los leucocitos presentes en la sangre perifrica del individuo; por una parte podemos contar la totalidad de los leucocitos, sin distinguir tipos, esto se denomina recuento de leucocitos totales, o bien, podemos contar los leucocitos distinguiendo sus diferentes tipos, y es lo que se conoce como recuento diferencial o frmula leucocitaria. 18editorialcep

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A. Recuento de leucocitos totalesEl recuento de leucocitos es la determinacin del nmero de estas clulas por unidad de volumen sanguneo. Esta tcnica es de importancia vital para el diagnstico y seguimiento de gran nmero de patologas tanto hematolgicas como no. Esta tcnica puede ser realizada por mtodos manuales o por mtodos automticos.

a. Mtodos manualesHa constituido hasta recientemente el procedimiento tradicional para el recuento leucocitario.

Recuento en cmaraTiene como fundamento la realizacin de una dilucin sangunea y el posterior recuento con una cmara cuentaglbulos y un microscopio ptico. Para la muestra, la sangre debe ser venosa. Para su conservacin utilizaremos un anticoagulante, si es posible EDTA. El lquido diluyente es el Lquido de Turk, y tiene la siguiente composicin: cido actico glacial, 2ml; destruye los glbulos rojos permitiendo una mayor visibilidad de los leucocitos. Solucin al 1% de violeta de genciana o azul de metileno, 1 ml; tien los ncleos de los leucocitos y permiten una mayor visibilidad. Agua destilada, 97 ml.

La cmara cuentaglbulos, se trata de un portaobjetos grueso con tres prismas en su superficie, de los cuales el central est dividido transversalmente en dos partes separadas por un surco. Este prisma central es 0,1 mm ms bajo que los laterales, de forma que al colocar un cubreobjetos sobre l queda entre ellos un espacio donde se coloca la muestra. En cada una de las mitades del prisma central, se ha trazado un retculo que vara en su diseo segn el modelo de la cmara. La cmara de Neubauer es similar, pero el cuadrado central se halla dividido en 400 cuadraditos. Este cuadro central es el utilizao para el contaje de hemates. Los cuatro cuadrados que se encuentran en las esquinas de la cuadrcula de recuento se dividen en 16 cuadrados diferentes, cada uno con 0'25 mm de lado, y son los usados para el recuento de leucocitos.PRISMAS

RETCULO La cmara de Burker tiene nueve cuadros de 1 mm de lado y 1 mm2 de superficie

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y Tema 19

Cmara de Burker Realizacin de la tcnica:

Cmara de Neubauer

La cmara ha de estar siempre limpia, seca y con el cubreobjetos montado, preparada para su uso. Preparar una dilucin 1/20 con el lquido de Turk (una parte de sangre y 19 de lquido). Agitar suavemente para homogeneizar la muestra. Llenado de la cmara: colocaremos una pipeta con la dilucin sobre el cubreobjetos montado en la cmara, situaremos la pipeta en posicin vertical y dejaremos caer una gota sobre el borde del cubreobjetos, en el rea situada sobre el rectngulo central; la plataforma se llenar por capilaridad. Recuento al microscopio: colocar la cmara en la platina del microscopio. Contar los leucocitos existentes en 4 de los cuadrados. Cada cuadrado est limitado por cuatro lneas, sobre las que se colocan algunos leucocitos, que no estn ni fuera ni dentro del cuadrado. Como norma se cuentan los leucocitos que se encuentren sobre dos de stas lneas como si estuvieran dentro, mientras que los que se encuentran sobre las otras dos no se cuentan. Clculo de los resultados: La superficie de cada cuadrado es de l mm2 y la altura del espacio entre l y el cubre es de 0, 1 mm. Por tanto, el volumen de sangre que cabe en este espacio es de 0,1 mm3. Al contarse 4 cuadrados, el volumen total examinado es de 0,4 mm3. Para calcular el nmero de leucocitos existente en 1 mm3 de dilucin, hay que multiplicar el nmero de leucocitos contados por 2,5 (1mm3 =0,4 mm3 x 2,5). Finalmente, como la sangre se diluy en una proporcin 1/20, para obtener el nmero de leucocitos en 1mm3 de sangre, hay que multiplicar por 20. Por tanto, en conjunto, hay que multiplicar por 50 el nmero de leucocitos contados en los 4 cuadrados.

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Fisiologa y morfologa del sistema leucocitario y Causas de error: Se acepta que el margen de error del recuento es aproximadamente del 20%, pero puede ser mayor por diversas causas: Realizacin incorrecta de la dilucin. Homogeneizacin incorrecta de la muestra. Mal ajuste del cubreobjetos y la cmara. Llenado incompleto de la cmara. Distribucin no homognea de las clulas. Recuento en un nmero insuficiente de clulas. Error al efectuar el recuento. Error al efectuar los clculos. Tras su uso, las cmaras y los cubreobjetos usados se lavarn con agua y jabn y sern secados con sumo cuidado y con materiales que no puedan daarlos ni dejar hilos. Una vez limpias las cmaras deben cogerse por los bordes y guardarlas; las impresiones digitales son difciles de eliminar y pueden inducir a errores.

Recuento por frotis sanguneoCuando tomamos una muestra sangunea, la introducimos en un tubo con anticoagulante, ya que solo en ocasiones excepcionales podremos realizar las pruebas necesarias de forma inmediata a la extraccin, que sera lo ideal. De esta manera podemos realizar extensiones sanguneas 2 3 horas tras la extraccin, incluso 24 horas si la sangre ha estado a 4C. Debemos tener presente que este almacenaje de la sangre puede conducir a errores, ya que determinados cuerpos celulares se alteran en este intervalo; estas variaciones son mucho mayores si conservamos la sangre en un tubo con EDTA. Denominamos frotis sanguneo a una fina pelcula de sangre sobre alguna superficie, esta pelcula ha de teirse para poder observar las distintas clulas presentes y, normalmente, se extiende sobre un portaobjetos. Para que la prueba sea correcta debemos tener cuidado en la extensin, fijacin y tincin de la muestra. Existen tres mtodos para realizar una extensin sangunea: Mtodo del portaobjetos o de la cua Emplearemos dos portaobjetos limpios y debidamente etiquetados. Sobre uno se extiende la sangre y el otro, que ser algo ms estrecho, realizar la extensin.

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La tcnica es la siguiente: Depositar una gota de sangre en un portaobjetos. Colocar el segundo portaobjetos, sujeto por el ndice y el pulgar, por delante de la gota y formando un ngulo de 30-45 grados. Se arrastra el segundo portaobjetos hacia atrs hasta que entre en contacto con la gota de sangre. Deslizar el portaobjetos hacia delante realizando la extensin. Secar la extensin agitando o con un ventilador para evitar que las clulas se contraigan. No cubre toda la superficie del portaobjetos. Su espesor disminuye de principio a fin. La sangre queda repartida de forma que no existen huecos blancos en mitad de la extensin. Las bandas laterales son lisas. Cabeza: es la zona ms prxima al punto de partida, es la ms gruesa, pudiendo aparecer hemates formando aglomerados o una mayor acumulacin de linfocitos. Cuerpo: zona intermedia, la distribucin de clulas es la adecuada para el recuento. Cola: zona ms alejada del inicio, suele acabar de forma irregular, con zonas deshilachadas que denominamos barbas, en stas se acumulan diferentes clulas, como granulocitos o monocitos.

Consideramos que la extensin est bien realizada si cumple los siguientes requisitos:

En una extensin bien hecha, quedan tres zonas bien diferenciadas:

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Mtodo del cubreobjetos En este caso usaremos dos cubreobjetos en vez de dos portaobjetos. La tcnica es la siguiente: Depositar una gota de sangre en un cubreobjetos. Colocar el segundo cubreobjetos sobre el primero formando una estrella de 8 puntas. Dejar que la sangre se extienda entre ellos. Separar ambos cubreobjetos en sentido paralelo y dejar secar al aire sobre un papel de filtro.

Para esta prueba es posible usar sangre capilar, poniendo una gota de sangre directamente del dedo del paciente sobre el cubreobjetos, teniendo cuidado de no tocar el cubreobjetos con el dedo. La manipulacin del cubreobjetos es ms difcil que la de los portaobjetos, ya que se rompen con mayor facilidad, pero la extensin es ms uniforme, pudiendo hacer el recuento en cualquier parte de l. Mtodo de centrifugacin Para realizar esta prueba necesitaremos Spinners, centrfugas que alcanzan velocidades de giro muy altas en muy poco tiempo, y que se detienen de la misma forma. La tcnica: colocamos una gota de sangre en el centro del portaobjetos y ste en la Spinner, la extensin se realizar de forma uniforme. Una vez hecha la extensin, para poder distinguir las diferentes clulas presentes en el frotis y facilitar su recuento vamos a teirlo antes de observarlo al microscopio.

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y Tema 19Para teir el frotis usaremos tintes del tipo Romanowsky, ya que stos tien de manera diferente la mayora de las clulas normales o patolgicas. Estos colorantes son derivados de la anilina y pueden ser de dos tipos: Bsicos: se fijan sobre estructuras de naturaleza cida, como el ADN o ARN, estas estructuras se denominan basfilas. Entre estos tintes nos encontramos, azul de metileno, azur A, azur B y azur C. cidos: Se fijan sobre estructuras de naturaleza bsica como la hemoglobina y se denominan acidfilas o eosinfilas. Un colorante cido es la eosina. Existen estructuras que se fijan a ambos colorantes y se denominan neutrfilas. A continuacin vamos a ver los distintos mtodos de tincin: Giemsa: Usaremos como colorante una mezcla de Azul de metileno,Azur B y Eosina. Este tinte tambin se vende directamente como polvo de Giemsa. Realizaremos la tincin de la siguiente forma: Fijar el frotis con metanol y esperar 3 minutos. Sumergir en una solucin de Giemsa, 10% de colorante Giemsa y 90% de tampn PBS, durante 10 minutos. Lavar con agua destilada y dejar secar. Observar al microscopio. May-Grundwald: el colorante se denomina May-Grundwald y consiste en una solucin alcohlica con Azul de metileno y Eosina.

La tincin se realiza de la siguiente forma: Sumergir el frotis en el colorante May-Grundwald durante 3 minutos. Pasar a una solucin al 50% de colorante y PBS durante 10 minutos. Lavar con agua destilada y dejar secar. Observar al microscopio. May-Grundwald - Giemsa (MGG): esta tincin tambin es conocida como panptica. Sumergir el frotis en una solucin de May-Grundwald durante 2 minutos. Pasar a una solucin diluida al 50 % de colorante May-Grundwald y PBS durante 2-3 minutos. Pasar a una solucin de Giemsa durante 20 minutos. Lavar con agua destilada. Sumergir en PBS 2-5 minutos. Secar y observar al microscopio. Wright Sumergir el frotis en el colorante durante 1 minuto. Diluir el colorante con agua destilada o PBS al 30-70% y dejar 10 minutos.editorialcep

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Fisiologa y morfologa del sistema leucocitario y Lavar con agua destilada y secar. Observar al microscopio. Gota gruesa: Con esta tincin podemos observar parsitos como el Plasmodium. Colocar en un portaobjetos una gota gruesa de sangre. Imprimir movimientos circulares para desfibrinarla. Dejar secar 24 horas. Sumergir en solucin de Giemsa y PBS durante 25 minutos. Lavar con agua destilada y observar. Leishman Fijar los frotis con tinte de Leishman no diluido durante 3 minutos. Diluir con buffer fosfato, en una proporcin de 2: 1 y dejar durante 9 minutos. Lavar con agua destilada y dejar secar. Observar al microscopio. Sudn negro Fijar el frotis en vapores de formalina durante 5-10 minutos. Lavar en agua destilada y dejar secar. Sumergir en el colorante durante una hora. Lavar con etanol al 70%. Aplicar la coloracin de contraste: Leishman o MGG. Reaccin de Pas Fijar los frotis con una solucin con 10 ml de formaldehdo al 40% y 90 ml de etanol durante 10 minutos. Lavar con agua de grifo. Sumergir en la solucin de cido perydico durante 10 minutos. Lavar con agua destilada y secar. Sumergir en la solucin de fucsina durante 30 minutos. Lavar con agua de grifo durante 5-10 minutos Aplicar la tincin de contraste durante 10-15 minutos. Peroxidasa: El tinte se prepara mezclando bencidina, etanol y perxido de hidrgeno. Fijamos los frotis introducindolos en una solucin de 10 ml de formaldehdo al 40% y 90 ml de etanol durante 10 minutos. Lavar con agua de grifo y dejar secar. Verter el colorante sin filtrar sobre el portaobjetos y dejar actuar durante 7 minutos.

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y Tema 19Lavar con agua del grifo y dejar secar. Aplicar el tinte de contraste.

Una vez realizada la tincin debemos ver el frotis al microscopio para observar qu tipos de clulas aparecen, en qu nmero, si se aprecian modificaciones celulares o clulas anormales..., para determinar la normalidad o anormalidad de la sangre analizada. Cada clula quedar teida de un color, en la siguiente tabla presentamos los colores de las diferentes clulas para facilitar su identificacin.LINFOCITOS MONOCITOS NEUTRFILOS GRANULOCITOS EOSINFILOS GRANULOCITOS BASFILOS GRANULOCITOS NEUTRFILOS AZUL AZUL GRISCEO ROSA CLARO ANARANJADO AZUL OSCURO PRPURA

b. Mtodos automticosAunque existen varios mtodos automticos o electrnicos, todos ellos tienen la misma base: Aspiran una cantidad muy pequea de sangre. Esta sangre la mezclan con lquidos de dilucin que producen hemlisis. Hacen pasar las clulas por un detector para su contaje.

La forma de deteccin de los leucocitos es lo que diferencia los distintos mtodos.

Mtodo de impedancia o de resistencia elctricaFue el primero en ser utilizado. La muestra de sangre es diluida y hecha pasar por un pequeo orificio (de unas 100 m) localizado entre dos electrodos. Cuando por el orificio pasa lquido de dilucin, que es un buen conductor de electricidad, la resistencia elctrica medida es muy baja (o lo que es lo mismo, la impedancia es muy alta). Cuando una clula atraviesa el orificio se produce un brusco incremento de la resistencia (o descenso de la impedancia).Aspiracin

Fotomultiplicador

Electrodos

La amplitud del impulso elctrico es proporcional a1 tamao de la clula, y para considerar que se trata de un leucocito, el tamao mnimo a de ser de 35 fl. Por tanto, cada impulso elctrico de una amplitud correspondiente o superior a 35 fl es contabilizado como un leucocito.

Orificio Partculas

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Mtodo de campo oscuroSe realiza la dilucin igua1 que en el mtodo anterior. La sangre diluida se hace pasa por un capilar estrecho de forma que las clulas solo puedan pasar de una en una, y es iluminado por un rayo de luz halgena de tugnsteno. Cuando no pasan clulas, el rayo de luz atraviesa el capilar e incide en el centro de un fotodetector, que no es sensible a la luz. Cuando pasa una clula 1a luz que incide sobre ella es desviada y llega a las regiones perifricas del fotodetector, que s son sensibles a la luz.Lquido de dilucin Suspensin de clulas

Mtodo de rayo lserEs bastante parecido al anterior. Se diferencia en que mientras no pasan clulas el rayo atraviesa el capilar e incide en el detector. Cuando una clula atraviesa el rayo ste deja de incidir en el detector, contabilizndose. Aunque los mtodos automticos son ms exactos que los manuales existen diversas causas de error: Presencia de partculas en el lquido diluyente que son contabilizadas como clulas si tienen el tamao suficiente. Presencia de burbujas contabilizadas como leucocitos. Presencia de eritrobastos que al ser nucleados tambin son contabilizados. Lisis incompleta de los hemates. Obstruccin del orificio o del capilar de recuento. Contaminacin de una muestra por la anterior, por limpieza incorrecta del sistema Mala homogeneizacin de la muestra. Leucocitosis excesiva, que hace que estos pasen en grupos por el orificio o capilar. Fallo en los mecanismos de deteccin. Fallos en los sistemas de clculo automtico.

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y Tema 19En la siguiente tabla se puede observar los valores normales en adultos de este recuento leucocitario:NEUTRFILOS SEGMENTADOS NEUTRFILOS EN BANDA EOSINFILOS BASFILOS LINFOCITOS MONOCITOS 1,4 7 x 10 9 / l 0 700 x 109 / l 0 0,45 x 109 / l 0 0,2 x 10 9 / l 0,9 5,2 x 10 9 / l 0,16 1 x 109 / l

B. Recuento diferencial de leucocitos, frmula leucocitariaLa frmula leucocitaria es el recuento porcentual de los distintos tipos de leucocitos presentes en sangre perifrica. Hasta muy recientemente esta tcnica se realizaba mediante la observacin microscpica de una extensin de sangre perifrica, pero actualmente existen instrumentos automticos capaces de realizada.

a. Mtodo manualSe basa en la observacin microscpica de una extensin de sangre perifrica teida con mtodos panpticos. La sangre puede proceder de extraccin capilar sin anticoagulante, o venosa anticoagulada con EDTA. En el segundo caso la muestra ha de ser procesada en las tres primeras horas de la extraccin, y en el primero no se debe utilizar la primera gota de sangre obtenida. La realizacin de la extensin y la tincin ya ha sido explicada con anteriormente en el recuento por frotis sanguneo. Las tinciones ms utilizadas son las de May-Grunwald-Giemsa y de Wright. El ltimo paso de todo el proceso es el examen del frotis, y el ms importante; debe ser realizado por personal experto. En primer lugar la extensin a de ser revisada con aumento x100 x200, con el fin de comprobar la calidad de la misma, de la tincin, la distribucin relativamente homognea de las clulas y la no presencia de agregados.Tambin se puede controlar a groso modo la cifra de leucocitos. Tras ello, ya con objetivo de gran aumento (x1000) se realiza la frmula leucocitaria propiamente dicha. Para ello elegiremos la zona central o cuerpo de la extensin, donde la distribucin celular es ms homognea. El recorrido que hay que seguir sobre la extensin es realizando movimientos horizontales seguidos de transversales y viceversa.

De esta forma se deben clasificar al menos 100 leucocitos. Si el recuento leucocitario es alto es preferible realizar la frmula sobre 200-300 clulas. Por otro lado, si el recuento es bajo (inferior a 1000/mcl) puede ser suficiente realizarlo sobre 50 clulas, pero siempre expresando los valores como porcentaje e indicando el nmero total de leucocitos observados.

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Fisiologa y morfologa del sistema leucocitario y El ltimo paso, tambin con el objetivo de gran aumento es comprobar la existencia o no de clulas patolgicas o morfolgicamente anmalas, aunque su nmero sea muy escaso. Las causas de error de este mtodo son: Frotis demasiado fino o demasiado grueso. Si al realizar la extensin la inclinacin del porta de arrastre es mayor de 45 la extensin ser corta y gruesa, mientras que si sta es menor ser fina y larga. En un frotis grueso las clulas se hallan comprimidas, siendo difcil la distincin entre linfocitos y monocitos. Si ste es muy fino los neutrfilos y monocitos quedan en las zonas perifrica, falseando la frmula. Distribucin irregular de las clulas. Debida a la diferencia de tamao. Los leucocitos ms pequeos quedan cerca del origen, mientras que los ms grandes son arrastrados hacia la cola. Tocar el porta con los dedos. En los fluidos corporales, y entre ellos el sudor, existen sustancias quimiotcticas que atraen a los neutrfilos hacia el lugar donde se ha tocado el porta. Realizacin tarda de la extensin. La exposicin prolongada al EDTA produce cambios morfolgicos en las clulas. Coloracin excesivamente azul que puede ser debida a: un frotis demasiado grueso, lavado insuficiente, incubacin excesivamente prolongada, empleo de tampones o agua excesivamente alcalinos y sangre anticoagulada con heparina. Coloracin excesivamente rosada: debido al uso de tampones o agua excesivamente cidos. Presencia de precipitados: por no filtrar el colorante antes de su uso. Error en la identificacin de las clulas. Realizar la frmula sobre un nmero escaso de leucocitos.

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b. Mtodos automticosEstos mtodos se han desarrollado durante los ltimos 20 aos, pero hasta muy recientemente no han alcanzado un nivel suficiente de fiabilidad y rapidez como para poder ser utilizado de forma rutinaria. Existen varios mtodos:

Mtodo morfolgicoSe trata de una cmara de televisin acoplada a un microscopio ptico convencional, que examina un frotis realizado y teido por mtodos habituales. Las imgenes obtenidas son procesadas por un computador, clasificando los leucocitos en sus cinco variedades normales o como clulas atpicas. Actualmente se encuentra en desuso, ya que presenta los mismos inconvenientes del mtodo habitual.

Mtodo de resistencia elctrica o impedanciaUsa el mismo sistema que para el recuento leucocitario. Segn la intensidad del impulso generado se calcula el volumen celular, y segn ste clasifica las clulas en linfocitos, monocitos y granulocitos (en su conjunto).editorialcep

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y Tema 19Mtodos multiparamtricosBasados en la citometra de flujo con rayo lser y la citoqumica. Valoran el tamao celular y nuclear, la forma de ncleo, la estructura cromatnica, la granularidad del citoplasma y las reacciones citoqumicas (generalmente la peroxidasa). Clasifican los leucocitos en sus cinco categoras habituales y en clulas atpicas. Son los ms utilizados actualmente. Tienen la gran ventaja de analizar un gran nmero de leucocitos, entre 25 y 30.000. Las limitaciones de los mtodos automticos: No son capaces de diferenciar los segmentados de los cayados. No detectan poblaciones celulares muy pequeas. No ofrecen informacin morfolgica, por lo que a veces algunas clulas patolgicas son clasificadas como normales.

En la siguiente tabla podemos observar los valores normales en adultos de la frmula leucocitaria:NEUTRFILOS SEGMENTADOS NEUTRFILOS EN BANDA EOSINFILOS BASFILOS LINFOCITOS MONOCITOS 40-75 % 06% 04% 01% 20 50 % 2 10 %

2.

PATOLOGAS DEL SISTEMA LEUCOCITARIO: ALTERACIONES CUANTITATIVAS Y CUALITATIVAS, PRUEBAS ANALTICAS PARA EL DIAGNSTICO Y SEGUIMIENTO DE ESTAS PATOLOGAS

2.1 Alteraciones cuantitativas del sistema leucocitarioCLULA Leucocitos Neutrfilos Eosinfilos Basfilos Linfocitos Monocitos AUMENTO Leucocitosis Neutrofilia Eosinofilia Basofilia Linfocitosis Monocitosis DISMINUCIN Leucopenia Neutropenia Eosinopenia Basopenia Linfopenia Monocitopenia

A. LinfocitosisLa linfocitosis es un aumento del volumen circulante de linfocitos, superior a 4000/mm3. Entre sus principales causas podemos nombrar:

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Fisiologa y morfologa del sistema leucocitario y Fisiolgicas: durante el desarrollo y crecimiento aparece una linfocitosis fisiolgica. Esta linfocitosis tambin aparece en la fase de convalecencia de grandes infecciones, indicando un buen pronstico de la enfermedad. Infecciones: ya sean vricas o bacterianas. Sndromes proliferativos: leucemia linfoides.

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B. MonocitosisPodemos definir la monocitosis como un aumento del recuento de monocitos en sangre perifrica superior a 1.000/mm3. Los monocitos presentan un papel fundamental en las reacciones inflamatorias e inmunitarias; de forma fisiolgica estarn aumentados cuando el sistema inmunolgico lo requiera, sobre todo en infecciones bacterianas crnicas como la tuberculosis o la endocarditis infecciosa. Estarn igualmente presentes en enfermedades hematolgicas que impliquen una proliferacin de su serie celular, como la leucemia monoctica.

C. GranulocitosisLos granulocitos son clulas grandes, y cuando su nivel sobrepasa los niveles normales, pueden llegar a contarse incluso 100.000/mm3 o 500.000/mm3, llegando a ocasionar alteraciones en la viscosidad sangunea, alteraciones respiratorias, gastrointestinales... aumentando la probabilidad de que aparezcan embolismos de arterias cerebrales, oclusiones y hemorragias que pueden ser letales para el paciente. Los sntomas generales son poco llamativos: fiebre, sudoracin y prdida de peso. Estos pacientes con recuentos de granulocitos elevados suelen presentar tambin aumento del tejido mieloide de la mdula sea, provocando dolores esquelticos y lesiones en el tejido seo. Pueden aparecer lesiones ms o menos intensas en cuerpos vertebrales, epfisis de huesos largos, costillas, crneo o pelvis. Si el aumento de la mdula sea es ectpico aparecern daos en hgado y bazo. Los pacientes suelen quejarse de malestar en abdomen superior, apareciendo dolor intenso si se ocasionan desgarros o infartos de la cpsula esplnica. En ocasiones est indicada la esplenectoma si el dolor se vuelve crnico. La funcin heptica no suele estar alterada, aunque la hiperplasia sea muy llamativa. Cuando estos granulocitos son metabolizados aparecen compuestos sencillos como aminocidos, azcares, purinas y pirimidinas. Estos metabolitos van a entrar a formar parte del proceso metablico del individuo sin presentar problemas. Slo ocasionan daos las purinas, que van a ser oxidadas por las xantinas y convertidas en cido rico: un aumento de tal magnitud en la excrecin de cido rico origina problemas tardos como gota, o mucho ms serios como nefropatas y uremia, que pueden ocasionar la muerte del paciente. Este es un dato que debemos tener en cuenta si decidimos tratar al paciente con una quimioterapia enrgica.

D. LinfopeniaSe define como el descenso de los linfocitos por debajo de 1.500/mcl.

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y Tema 19En general existe linfopenia en todos los casos de leucopenia severa, independientemente de su origen. Puede verse en los siguientes casos: Insuficiencia cardiaca congestiva. Enfermedad de Hodgkin, en sus estadios iniciales. Tratamiento con corticoides.

E. GranulocitopeniaPodemos definir la granulocitopenia como una disminucin de las clulas granulocticas en sangre perifrica, es decir, una disminucin del nmero de neutrfilos, eosinfilos y basfilos en sangre perifrica. Pese a esto, actualmente esta palabra es sinnimo de disminucin de neutrfilos. Los valores normales de neutrfilos en sangre perifrica oscilan entre 2.000 y 6.500/mm3, los pacientes que presentan valores inferiores a 1.000/mm3 comienzan a tener problemas y los que presentan valores inferiores a 500/mm3 desarrollan de forma invariable graves infecciones bacterianas. La neutropenia puede ser debida a diversas causas, que por orden de frecuencia son: Ingesta de medicamentos. Se han descrito ms de 100 frmacos capaces de producir neutropenia, siendo los ms frecuentemente asociados a sta los antiinflamatorios no esteroideos. Enfermedades del tejido conectivo. Fundamentalmente la artritis reumatoide y el lupus eritematoso sistmico. Infecciones. La neutropenia es frecuente en las viriasis. Cuando se presentan en el curso de una infeccin bacteriana o fngica suele denotar un cierto grado de agotamiento medular. De todas formas, existen enfermedades bacterianas y fngicas en las que la neutropenia es un dato relativamente constante. Las infecciones capaces de producir neutropenias aparecen en la siguiente tabla:Bacterianas Tuberculosis diseminada Salmonelosis Brucelosis Rickettsiosis Vricas Rubola Gripe Mononucleosis infecciosa Infeccin citomeglica Hepatitis

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Fisiologa y morfologa del sistema leucocitario yFngicas Histoplasmosis Protozoarias Leishmaniasis visceral

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Neutropenia crnica idioptica. De origen desconocido. Neutropenias congnitas.

El caso ms sorprendente de granulocitopenia es la agranulocitosis aguda: los granulocitos desaparecen de forma brusca del torrente circulatorio. La sintomatologa de este paciente pasa inadvertida, como caso extremo presentar malestar, escalofros y fiebre. En algunos casos de granulocitopenia el organismo responde aumentando los niveles de monocitos que, por tener funciones parecidas, sustituyen a estos granulocitos, pasando inadvertida durante mucho tiempo la enfermedad.

2.2 LeucemiasPodemos definir la leucemia como una enfermedad neoplsica de los rganos formadores de las clulas sanguneas. Aunque lo normal es que en la leucemia lo que aparezca sea una proliferacin de leucocitos cancergenos, tambin puede haber una proliferacin de otras clulas sanguneas como los eritrocitos. Este tipo es muy extrao y se denomina eritroleucemia. Estas clulas cancergenas van a proliferar sobre todo en la mdula sea, aunque tambin en otros rganos como el bazo, SNC, riones, piel, ganglios linfticos... Sobre la leucemia desconocemos muchas cosas, no sabemos cul es su patogenia ni su factor causal, aunque, como siempre, tenemos varias teoras sobre ambas cosas; las investigaciones apuntan, entre otros, haca los siguientes factores causales: Sustancias qumicas. Exposicin a radiaciones. Infecciones vricas. Defectos en el sistema inmune. Herencia

Para su patogenia la teora ms aceptada es la aparicin de una clula mutante de las que derivaran todas las dems y que el sistema inmune no ha reconocido como fallo. El sistema inmune realiza una revisin de las clulas formadas, destruyendo aquellas que son "defectuosas". Los tipos de leucemia van a estar en funcin de dos factores principales: el tipo de clulas afectadas, si son las de la rama linfoide estarn afectados los linfocitos y se denomina linfoctica, y si son las de la rama mieloide estarn afectados los granulocitos y monocitos y se denominar mieloctica. El otro factor es la rapidez con la cual se instaura en el organismo, si lo hacen en un periodo breve se denomieditorialcep

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y Tema 19nan agudas, son ms peligrosas y presentan muy mal pronstico, y si lo hacen en un tiempo mayor se denominan crnicas. Es importante recordar que las crnicas no son las agudas que se mantienen en el tiempo, son un tipo completamente diferente. Atendiendo a estos dos factores tenemos las siguientes clases de leucemia: LMA: leucemia mieloctica aguda. LLA: leucemia linfoctica aguda. LMC: leucemia mieloctica crnica. LLC: leucemia linfoctica crnica.

Estos cuatro tipos pueden dividirse a su vez en varios subtipos, atendiendo al grado de madurez de las clulas afectadas. Estos subtipos son importantes a la hora del tratamiento, adems cada subtipo es caracterstico de una edad.

A. Leucemias agudasLas leucemias agudas se caracterizan por su rpida instauracin y por una proliferacin de clulas malignas en un grado muy temprano de madurez; son clulas inmaduras y no diferenciadas que ocasionan la muerte del paciente en muy poco tiempo. Estas clulas neoplsicas invaden la mdula sea e impiden la formacin de las clulas sanas aunque tambin pueden invadir otros rganos. Su frecuencia en adultos es de un 0,5%. En nios, las formas linfoblsticas son la principal causa de muerte por neoplasias. Como las clulas neoplsicas son inmaduras y poco diferenciadas, esto ha ocasionado grandes problemas a la hora de clasificar las diferentes leucemias agudas; actualmente contamos con varios mtodos como las tinciones panpticas, cultivos de clulas medulares, tcnicas citoqumicas, etc. Como consecuencia existen multitud de clasificaciones. La ms aceptada es la realizada por el Grupo Cooperativo franco-Americano-Britnico (FAB), que se basa en el aspecto morfolgico y el comportamiento celular antes del tratamiento:

LEUCEMIA Mieloblstica aguda sin maduracin Mieloblstica aguda con maduracin Promieloctica Mielomonoctica aguda Monoctica aguda Eritroleucemia Megacarioblstica

DIFERENCIACIN PREDOMINANTE Granulocitos Granulocitos Granulocitos Granulocitos y monocitos Monocitos Eritrocitos y granulocitos Megacariocitos

El cuadro clnico va a venir motivado por la disminucin de las clulas normales. Debido a la invasin medular, aparecer una trombopenia (disminucin de plaquetas), leucopenia (disminucin de leucocitos sanos) y anemia. Puede que haya infiltracin en otros tejidos como el bazo o el SNC, que tambin nos van a dar sntomas. El tiempo que tarda el paciente en consultar al mdico es relativamente corto, ya que si bien los sntomas no son muy molestos s son muy llamativos: 34editorialcep

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Fisiologa y morfologa del sistema leucocitario y La leucopenia nos lleva a la presencia de infecciones repetidas, el paciente no tiene defensas. La anemia nos ocasiona el mal estado general, con astenia, palidez, disnea... La trombopenia nos dar la sintomatologa llamativa, al fallar nuestro sistema de coagulacin aparecern pequeas hemorragias como epistaxis, gingivorragias al cepillarse los dientes, hematomas por pequeos golpes y petequias.

A medida que evoluciona la enfermedad los sntomas hemorrgicos se harn cada vez ms evidentes, siendo casi constante la presencia de CID (coagulacin intravascular diseminada) y grandes hematomas que se iniciarn en los miembros inferiores para ir extendindose; estos elementos hemorrgicos pueden formar ppulas con el centro necrosado. La afectacin del SNC se muestra con una clnica muy variada: el dao puede ser producido por hemorragias, existiendo peligro de hemorragias cerebrales letales para el paciente, y otras veces el dao puede ser menor, las hemorragias pueden comprimir zonas cerebrales y alterar cualquier funcin, depender de la parte afectada. Las alteraciones tambin pueden ser debidas a la invasin del SNC por los leucocitos alterados, apareciendo infiltraciones leucocitarias que pueden obstruir los capilares cerebrales. Otro sntoma frecuente es la inflamacin de las gnadas, los testculos aparecen inflamados por las infiltraciones de leucocitos. Estas infiltraciones en gnadas y SNC causan grandes problemas, ya que la quimioterapia por va normal no llega hasta ellos, convirtindose as en reservorio de leucocitos alterados. Las infecciones son un gran problema, pudiendo ocasionar la muerte del paciente, ya que nos encontramos con un sistema inmunolgico daado por la enfermedad. Los microorganismos que suelen originar estas infecciones son los siguientes: E. coli, Klebsiella, Pseudomonas, estafilococos y proteus, pudiendo tambin aparecer hongos como las cndidas. En la exploracin del paciente, adems de los llamativos sntomas descritos con anterioridad, podemos apreciar esplenomegalia y hepatomegalia. Otro sntoma que suele aparecer en adultos es una hipertrofia gingival, ms frecuente y con mayor intensidad en las leucemias agudas monocticas, al igual que las infiltraciones cutneas. La mayora de estos sntomas no son intrnsecos de una leucemia aguda, por lo cual debemos confirmar el diagnstico con pruebas analticas. En el anlisis de la sangre perifrica del paciente encontraremos anemia y trombopenia, en la frmula leucocitaria detectaremos un aumento de los blastos y una disminucin llamativa de neutrfilos. La mdula sea ser la que diagnosticar la enfermedad, en ella encontramos: Abundante celularidad, sobre todo elementos atpicos. Ausencia de formas intermedias, esto se denomina hiatus leucmico, y es un factor decisivo en el diagnstico de la enfermedad. Rasgos atpicos en las pocas clulas maduras que encontramos.

En el estudio bioqumico apreciamos niveles elevados de LDH, potasio, fsforo, calcio y cido rico. Para completar el diagnstico y poder tipificar la leucemia del paciente realizamos estudios citoqumicos y fenotipaje inmunolgico. Los cuerpos de Auer, son caractersticos de la LMA.editorialcep

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y Tema 19B. Leucemias crnicasLas leucemias crnicas se caracterizan por su evolucin, que es mucho ms lenta que en las anteriores; su pronstico es mejor o suele serlo. Lo caracterstico es que el paciente presente una enfermedad larga, con periodos de remisin en los que se encuentra en perfecta forma, y recadas, lo que lleva a la desesperacin de los enfermos. Tampoco sabemos cul es la etiologa de esta enfermedad. Nos podemos encontrar con dos tipos de leucemias crnicas, dependiendo de cules sean las clulas afectadas: Leucemia mieloide crnica (LMC) y Leucemia linfoide crnica (LLC).

a. Leucemia mieloide crnica (LMC)Es una enfermedad neoplsica donde se ven afectados los granulocitos y monocitos, ms normal en hombres y en adultos, aunque puede aparecer a cualquier edad. Aunque se han demostrado casos en los que los pacientes han estado expuestos a sustancias qumicas o radiaciones, muchas veces estos pacientes han presentado alteraciones genticas, desapareciendo un cromosoma que se ha denominado Filadelfia, apareciendo un posible componente gentico. La enfermedad se puede descubrir en un anlisis rutinario o por peticin expresa del paciente, que va por encontrarse mal. Los principales signos clnicos que presenta el paciente son: Astenia. Decaimiento. Disnea. Palidez. Dolor en hipocondrio izquierdo. Este dolor se debe al mayor volumen del bazo.

Aunque este sea el comienzo tpico de esta enfermedad pueden aparecer otros signos que alertan al paciente: artralgia, pericarditis y derrames pleurales. Por supuesto tambin pueden aparecer las alteraciones tpicas de las infiltraciones leucocitarias, como alteraciones del SNC (vrtigo, hipoacusia...) u oclusiones venosas, aunque son extraas; slo aparecen cuando los niveles de leucocitos estn muy elevados. La hepatomegalia, aunque suele estar presente no suele ser muy grande, slo en fases finales de la enfermedad, apareciendo ascitis y circulacin colateral; en estos casos el desenlace suele ser rpido y letal. En sangre perifrica nos encontramos con una anemia moderada, unos niveles plaquetarios normales o ligeramente elevados, y un dato muy llamativo, una leucocitosis a expensas de los granulocitos. Este dato se va a confirmar en el estudio de la mdula sea, donde aparece un aumento de las series granulocticas, siendo escasa la proporcin de blastos (predominan las formas maduras). En el estudio bioqumico nos encontramos con un aumento de la vitamina B 12, cido rico y LDH.

b. Leucemia linfoide crnica (LLC)La caracterstica principal de estos enfermos es la presencia de clulas monoclonales B con dificultades para su divisin y clonacin pero con una vida media muy larga, lo que les lleva a la invasin a largo plazo de la mdula sea y otros rganos linfoides. 36editorialcep

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Fisiologa y morfologa del sistema leucocitario y Es ligeramente superior en hombres y aparece de forma rara en individuos menores de 40 aos, aunque es posible. Su aparicin no parece estar relacionada a la exposicin a radiaciones o sustancias qumicas, lo que lleva a pensar a los investigadores en causas de origen gentico. El descubrimiento suele ser tardo, ya que al aparecer en personas de edad avanzada la astenia, sntoma inicial, suele achacarse a la edad o cansancio normal de su vida, cuando ste no cede en meses, o aparecen otros sntomas como palidez severa o infecciones reiteradas, es cuando se acude al mdico. Otra posibilidad es descubrirla por casualidad en un anlisis rutinario. Otros sntomas que pueden alertar al paciente son las adenopatas simtricas o el malestar provocado por el aumento del bazo, al igual que en el caso anterior, pero es ms extrao. Las clulas normalmente alteradas en estas enfermedades son las B, aunque en casos extraos son las T las que aparecen daadas. Sus principales caractersticas, adems del aumento de las clulas T daadas, son las siguientes: Escasa infiltracin medular. Neutropenia. Esplenomegalia llamativa. Lesiones cutneas.

El dato llamativo de laboratorio es el aumento de linfocitos sobre el resto de las clulas; stos normalmente son maduros aunque vamos a encontrar tambin linfocitos atpicos (pequeos de ncleo redondo a penas sin citoplasma y muy dbiles, por eso se rompen). En las extensiones sanguneas hallamos sombras nucleares de Gumprecht, producidas por linfocitos que se han roto al realizar el frotis. En la mdula sea podemos confirmar el aumento de esta serie.

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y ESQUEMAClasificacin de los leucocitosNeutrfilos

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FISIOLOGA Y MORFOLOGA DEL SISTEMA LEUCOCITARIO: RECUENTO Y CLASIFICACIN DE LOS LEUCOCITOS, TCNICAS HISTOQUMICAS E INMUNOLGICAS DE IDENTIFICACIN LEUCOCITARIA

Son clulas redondeadas con un dimetro de 12-14 m. Presenta un ncleo condensado y dividido en varios lbulos, normalmente tres (aunque oscila entre 2 y 5), unidos entre s por cordones de cromatina; sta ltima hace que se tia intensamente. Este ncleo segmentado le permite mayor facilidad a la hora de atravesar espacios pequeos, las clulas que presentan ncleos sin segmentar tendrn mayor dificultad

Neutrfilos en bandaEn la ltima fase de la maduracin de los granulocitos es cuando se produce la segmentacin nuclear; a continuacin explicamos la secuencia: Metamielocito Bandas o cayados Segmentados

Granulocitos eosinfilosEn su estadio maduro son clulas redondas o ligeramente ovaladas con un dimetro entre 12 y 17 m Su ncleo posee dos lbulos, generalmente en forma de gafas, (en ocasiones excepcionales tres) y en su citoplasma podemos distinguir, aproximadamente, 20 grnulos con un tamao entre 0,5 y 1,5 m. Estos son brillantes y anaranjados cuando los teimos con eosina

Granulocitos basfilosSon clulas redondeadas, un poco ms pequeas que los anteriores, su dimetro va de 10 a 13 m Son los granulocitos ms pequeos Su ncleo es bilobulado o presenta slo una pequea "mella"; este ncleo es difcil de ver porque la gran cantidad de granulaciones existentes se acomodan por encima de este y lo ocultan

LinfocitosLinfocitos pequeos Linfocitos grandes Clulas plasmticas o plasmocitos

MonocitosSon clulas que pueden adoptar formas diferentes: redondeadas, ovaladas o irregulares, por la presencia de pseudpodos

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y Esquema 19Los monocitos se transformarn en macrfagos o histiocitos al llegar a los tejidos, formando parte del sistema mononuclear fagoctico (SMF)

Recuento de los leucocitosRecuento de leucocitos totalesMtodos manuales Recuento en cmara Recuento por frotis sanguneo Mtodos automticos Mtodo de impedancia o de resistencia elctrica Mtodo de campo oscuro Mtodo de rayo lser

Recuento diferencial de leucocitos, frmula leucocitariaMtodo manual Mtodos automticos Mtodo morfolgico Mtodo de resistencia elctrica o impedancia Mtodos multiparamtricos

PATOLOGAS DEL SISTEMA LEUCOCITARIO: ALTERACIONES CUANTITATIVAS Y CUALITATIVAS, PRUEBAS ANALTICAS PARA EL DIAGNSTICO Y SEGUIMIENTO DE ESTAS PATOLOGAS Alteraciones cuantitativas del sistema leucocitarioLinfocitosisLa linfocitosis es un aumento del volumen circulante de linfocitos, superior a 4000/mm3. Entre sus principales causas podemos nombrar: Fisiolgicas Infecciones Sndromes proliferativos

MonocitosisPodemos definir la monocitosis como un aumento del recuento de monocitos en sangre perifrica superior a 1.000/mm3 Los monocitos presentan un papel fundamental en las reacciones inflamatorias e inmunitarias; de forma fisiolgica estarn aumentados cuando el sistema inmunolgico lo requiera, sobre todo en infecciones bacterianas crnicas como la tuberculosis o la endocarditis infecciosa

GranulocitosisLos granulocitos son clulas grandes, y cuando su nivel sobrepasa los niveles normales, pueden llegar a contarse incluso 100.000/mm3 o 500.000/mm3, llegando a ocasionar alteraciones en la viscosidad sangunea, alteraciones respiratorias, gastrointestinales... aumentando la probabilidad de que aparezcan embolismos de arterias cerebrales, oclusiones y hemorragias que pueden ser letales para el paciente

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Fisiologa y morfologa del sistema leucocitario y

LinfopeniaSe define como el descenso de los linfocitos por debajo de 1.500/mcl En general existe linfopenia en todos los casos de leucopenia severa, independientemente de su origen

GranulocitopeniaPodemos definir la granulocitopenia como una disminucin de las clulas granulocticas en sangre perifrica, es decir, una disminucin del nmero de neutrfilos, eosinfilos y basfilos en sangre perifrica. Pese a esto, actualmente esta palabra es sinnimo de disminucin de neutrfilos Los valores normales de neutrfilos en sangre perifrica oscilan entre 2.000 y 6.500/mm3, los pacientes que presentan valores inferiores a 1.000/mm3 comienzan a tener problemas y los que presentan valores inferiores a 500/mm3 desarrollan de forma invariable graves infecciones bacterianas

LeucemiasPodemos definir la leucemia como una enfermedad neoplsica de los rganos formadores de las clulas sanguneas Aunque lo normal es que en la leucemia lo que aparezca sea una proliferacin de leucocitos cancergenos, tambin puede haber una proliferacin de otras clulas sanguneas como los eritrocitos. Este tipo es muy extrao y se denomina eritroleucemia Estas clulas cancergenas van a proliferar sobre todo en la mdula sea, aunque tambin en otros rganos como el bazo, SNC, riones, piel, ganglios linfticos... Atendiendo a estos dos factores tenemos las siguientes clases de leucemia: LMA: leucemia mieloctica aguda LLA: leucemia linfoctica aguda LMC: leucemia mieloctica crnica LLC: leucemia linfoctica crnica

Leucemias agudasLas leucemias agudas se caracterizan por su rpida instauracin y por una proliferacin de clulas malignas en un grado muy temprano de madurez; son clulas inmaduras y no diferenciadas que ocasionan la muerte del paciente en muy poco tiempo

Leucemias crnicasLas leucemias crnicas se caracterizan por su evolucin, que es mucho ms lenta que en las anteriores; su pronstico es mejor o suele serlo. Lo caracterstico es que el paciente presente una enfermedad larga, con periodos de remisin en los que se encuentra en perfecta forma, y recadas, lo que lleva a la desesperacin de los enfermos Leucemia mieloide crnica (LMC) Leucemia linfoide crnica (LLC)

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